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Maria Teresa VIETRI

Insegnamento di LABORATORIO DI METODOLOGIE MOLECOLARI

Corso di laurea in TECNICHE DI LABORATORIO BIOMEDICO (ABILITANTE ALLA PROFESSIONE SANITARIA DI TECNICO DI LABORATORIO BIOMEDICO)

SSD: MED/46

CFU: 3,00

ORE PER UNITÀ DIDATTICA: 30,00

Periodo di Erogazione: Primo Semestre

Italiano

Lingua insegnamento

ITALIANO

Contenuti

Conoscenze di base delle principali tecniche molecolari in uso in Diagnostica nei laboratori di Patologia clinica

Testi di riferimento

M. Cioffi “Manuale di diagnostica di laboratorio” Minerva medica
T. Strachan A.P. Read. “Genetica umana molecolare” UTET

Obiettivi formativi

Il corso ha l’obiettivo di fornire agli studenti lezioni pratiche di laboratorio di metodologie molecolari, affinché abbiano una conoscenza pratica delle principali tecniche molecolari in uso nei laboratori di Patologia clinica

Prerequisiti

- Fondamenti di fisica e chimica generale
- Fondamenti di biologia e biochimica
- Fondamenti di fisiologia
- Fondamenti di microbiologia

Metodi didattici

Il Corso sarà svolto con lezioni frontali e lezioni pratiche in laboratorio

Modalità di verifica dell'apprendimento

La verifica dell’apprendimento sarà effettuata mediante un colloquio orale, volto ad accertare le conoscenze degli argomenti affrontati durante il corso

Altre informazioni

Per chiarimenti e problematiche inerenti agli argomenti dell’ insegnamento gli studenti possono rivolgersi al docente di riferimento secondo le modalità di ricevimento indicate nella pagina web

Programma esteso

1. Estrazione di DNA da leucociti e dosaggio degli acidi nucleici
2. Preparazione di una reazione di PCR (Polymerase Chain Reaction) e PCR Multiplex
3. Preparazione di un gel d’agarosio ed elettroforesi degli acidi nucleici
4. Preparazione di una PCR ARMS e valutazione dei risultati con elettroforesi
5. PCR Reverse Dot-Blot per l’identificazione di mutazioni note con metodica automatizzata
6. Real-time PCR ed esempi di applicazione in diagnostica di laboratorio
7. Sequenziamento automatico di Sanger, comparazione delle sequenze ottenute con le sequenze wild-type e gestione del software

English

Teaching language

Italian

Contents

Basic knowledge of the main molecular techniques used in diagnostics in clinical pathology laboratories

Textbook and course materials

M. Cioffi “Manuale di diagnostica di laboratorio” Minerva medica
T. Strachan A.P. Read. “Genetica umana molecolare” UTET

Course objectives

The course aims to provide students with practical laboratory lessons in molecular methodologies, so that they have a practical knowledge of the main molecular techniques used in clinical pathology laboratories.

Prerequisites

- Fundamentals of physics and general chemistry
- Fundamentals of biology and biochemistry
- Fundamentals of physiology
- Fundamentals of microbiology

Teaching methods

The course will be held with lectures and practical lessons in the laboratory

Assessment methods

The learning assessment will be carried out through an oral interview, aimed at ascertaining the knowledge of the topics covered during the course.

Other information

For clarifications and problems relating to the topics of the course, students can contact the relevant teacher according to the reception methods indicated on the web page

Detailed syllabus

1. DNA extraction from leukocytes and nucleic acid analysis
2. Preparation of a PCR (Polymerase Chain Reaction) and Multiplex PCR reaction
3. Preparation of an agarose gel and nucleic acid electrophoresis
4. Preparation of an ARMS PCR and evaluation of the results with electrophoresis
5. Reverse Dot-Blot PCR for the identification of known mutations with an automated method
6. Real-time PCR and examples of its application in laboratory diagnostics
7. Automatic Sanger sequencing, comparison of the obtained sequences with wild-type sequences, and software management

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